【摘 要】
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目的通过构建茉莉酸甲酯(MeJA)处理的白木香cDNA文库,为揭示伤害诱导沉香倍半萜合成的分子机制奠定基础。方法以MeJA处理的白木香愈伤组织为材料,以改造的pGADT为载体,利用SM
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室,
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目的通过构建茉莉酸甲酯(MeJA)处理的白木香cDNA文库,为揭示伤害诱导沉香倍半萜合成的分子机制奠定基础。方法以MeJA处理的白木香愈伤组织为材料,以改造的pGADT为载体,利用SMART技术构建白木香全长cDNA文库。结果构建的文库原始滴度为8.99×106 pfu/mL,阳性克隆子的比例为97%,插入片段的大小在500~3 000 bp,平均大于1 000 bp。结论构建的文库无论从库容量、克隆效率,还是全长率方面评价,均达到了高质量文库的要求。
OBJECTIVE: To construct the white woody cDNA library treated with methyl jasmonate (MeJA), which lays the foundation for revealing the molecular mechanism of damage-induced sesbania biosynthesis. Methods MejA treated whitewood callus as material, the modified pGADT as a carrier, the use of SMART technology to construct full-length white woody cDNA library. Results The original titer of the constructed library was 8.99 × 106 pfu / mL, and the percentage of positive clones was 97%. The inserted fragment size ranged from 500 to 3 000 bp, averaging over 1 000 bp. Conclusion The constructed libraries met the requirements of high-quality libraries in terms of library size, cloning efficiency and full-length evaluation.
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