哈密瓜SSR体系的建立及反应条件的优化

来源 :西安文理学院学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiaobianhongyaogqw
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以新疆哈密瓜为试验材料,利用正交试验设计研究了4个主要因子(Mg^2+、DNA聚合酶、SSR引物和dNTP)对SSR扩增结果的影响,并对该哈密瓜SSR反应体系进行了优化,同时尝试用降落(Touchdown,TD)PCR方法扩增目的片段.最终筛选出如下最佳反应体系:总反应体积为25止,其中dNTP200μmol/L,SSR引物0.75μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,Mg^2+1.5mmol/L;降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增,
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