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【摘要】目的探讨糖尿病自身抗体测定对糖尿病诊断、分型及治疗中的应用价值。方法实验分为3组：1型糖尿病（T1DM）组、2型糖尿病（T2DM）组、健康对照组。采用免疫印迹法对糖尿病自身抗体GADA、ICA、IAA、IA-2A进行分析。结果GADA、ICA、IAA、IA-2A在T1DM组中检出率分别为65.33%、38.00%、24.67%、10.47%，在T2DM组分别为17.27%、13.39%、12.40%、5.45%，以及健康对照组中为0.00%、1.00%、0.00%、2.00%。T1DM和T2DM与健康对照组比较均有统计学差异P<0.05；T1DM与T2DM比较其阳性率明显高于T2DM，P<0.05，GADA最易检出。结论GADA、ICA、IAA、IA-2A的测定对糖尿病的诊断和分型有着重要的临床意义；四种抗体联合检测更能提高阳性率，避免漏诊。
【关键词】糖尿病；谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）；胰岛细胞抗体（ICA）；胰岛素抗体（IAA）；酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）
糖尿病（diabetes）是一种常见且多发的内分泌系统性疾病，是一种因胰岛素分泌绝对或相对不足而引起的以高糖血症为主要特征的代谢性疾病，其患病率随着现在生活水平和生活方式的改变正逐年提高。按照1999年WHO关于DM分类及诊断建议标准，DM按照病因学主要分为T1DM和T2DM，而糖尿病患者血清中可检出多种胰岛抗体，其中T1DM患者在无症状以及发病后一段时期内体内可检出针对胰岛β细胞的自身抗体包含GADA、ICA、IAA、IA-2A等几种抗体，每一种抗体和T1DM的发生、发展密切相关。糖尿病自身抗体的联合检测可用来诊断糖尿病和不同类型的糖尿病。本文分别对T1DM和T2DM及健康人检测了GADA、ICA、IAA、IA-2A，探讨糖尿病自身抗体对T1DM的诊断和与T2DM的鉴别价值，及时对糖尿病做出早期诊断及分型，对改善患者生存质量和预后十分重要。
1资料与方法
1.1一般资料健康对照组100例，男54例，女46例；年龄20-65岁。糖尿病组286例，男166例，女120例；年龄15-76岁；其中1型糖尿病66例，2型糖尿病220例，66例1型糖尿病，有63例至少一种抗体阳性，阳性率95.40%；检测220例2型糖尿病，有36例至少一种抗体阳性，阳性率16.30%。T1DM和T2DM诊断及分类按世界卫生组织（1999年）标准。健康对照组为我院2011年健康体检者，排除心、脑、肝、肾等慢性疾病及内分泌疾患，无糖尿病家族史。
1.2标本采集所有受检人员均早晨空腹静脉采非抗凝血2ml，血清分离后，-20℃以下冻存待测。测定方法：GADA、ICA、IAA、IA-2A四种抗体的联合检测均应用深圳市伯劳特生物制品有限公司生产的糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒检测，严格按照说明书操作。
1.3统计学方法采用SPSS10.0统计软件包进行数据处理，各参数以χ±s表示，计数资料采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1T1DM和T2DM组与对照组GADA、ICA、IAA、IA-2A检测阳性率比较见表1。结果显示：T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A抗体检测均显著高于对照组P<0.05。在T1DM组，GADA分别和ICA、IAA、IA-2A比较，四种抗体的阳性率依次为GADA>ICA>IAA>IA-2A，单一抗体最高阳性率与多个抗体最高阳性率比较，P<0.05。
2.2T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A检测阳性率比較见表2。结果显示：T1DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A抗体检测阳性率明显高于T2DM组，P<0.05。
3讨论
糖尿病是内分泌科的一种常见疾病，对糖尿病的早期诊断和分型以及其治疗有着十分重要的意义。以往糖尿病的分型主要依据患者的临床表现和血清胰岛素、C肽水平，但此分型方法对成人隐匿性免疫糖尿病不容易察觉，因此具有一定的局限性。近年来，随着糖尿病免疫标志物的出现，对糖尿病的临床分型又有了新的依据[1]。
T1DM是因为胰岛β细胞自身免疫破坏所致，其自身免疫特性表现为患者外周血中存在多种针对胰岛β细胞的自身抗体。谷氨酸脱羧酶（GAD）是将谷氨酸转化成抑制神经递质r氨基丁酸（GABA）的限速酶，其抗体（GADA）是T1DM最早出现的抗体。研究发现GADA阳性在一定程度上反应β细胞损害程度较重[2]。在患者出现T1DM临床表现前数年甚至数十年就可出现，在初发T1DM患者血中阳性率可达60%-80%[3]，作为成人迟发自身免疫性糖尿病（LADA）的预测和早期诊断指标。而在T2DM和正常人血液中的阳性率很低。本文T1DM组GADA阳性率为65.33%与T2DM组的17.27%有统计学差异，说明GADA在T1DM的诊断与T2DM的鉴别方面有重要意义。可以将LADA与T2DM区别开来，为正确分型提供确切的指标，从而更好地指导治疗。
胰岛细胞抗体（ICA）是一种存在于患者血清中的免疫球蛋白，对胰岛细胞的胞桨成分产生细胞毒效应，为特异性抗体，新发的T1DM中阳性率为65%-85%，但它随着病程延长，阳性率逐渐降低，诊断后2-5年阳性率降至20%。因此对少年起病的T1DM早期有较高的诊断价值，随着病程的进展，ICA阳性率下降较快，其诊断价值明显减小。所以目前认为ICA阳性预示β细胞的自身免疫损害，只作为糖尿病的高危指标，在儿童阳性或高水平持续阳性时，对T1DM才具有较高的预测性。
胰岛素抗体（IAA）是一组与胰岛素结合的抗体，不是糖尿病的特异抗体，在胰岛素自身免疫综合征、甲状腺疾病以及部分正常人中也出现阳性。在新发T1DM儿童中阳性率达50%-70%，在新发T1DM成人患者中阳性率仅为20%-30%。IAA它绝大多数与胰岛素结合，形成抗原抗体复合物而失去生物活性，因此，它为T1DM治疗提供重要依据，也是评价药用胰岛素的理想指标。本文T1DM组IAA阳性率24.67%显著高于T2DM组12.40%（P<0.05）。
酪氨酸磷酸酶样蛋白质分子抗体（IA-2A）是由979个氨基酸组成的I型跨膜黏蛋白，代表胰岛素β细胞特异性免疫。对胰岛β细胞损害的标志性作用比GADA更具特异性。IA-2A在T1DM初诊后多年存在，对T1DM诊断价值较大。IA-2A主要与经典的T1DM相关。近年来研究表明，IA-2A与GA-DA联合检测在筛查自身免疫中T1DM有一定意义[4]。本文IA-2A的阳性率虽然没有GADA高，但据临床观察，部分IA-2A阳性而GADA阴性的患者仍为典型的T1DM，说明两抗体出现的情况并不完全重叠，联合检测有助于提高检出率。
本研究表明，GADA、ICA、IAA、IA-2A四种抗体联合检测明显高于任何单一抗体的检测（P<0.05），联合检测具有互补性，可以提高实验室的诊断率，对于糖尿病及时、准确的分型具有重要的意义。还可作为T1DM高危人群流行病学的筛选指标[5]。
参考文献
[1]武传龙，王宝燕，刘方达.GAD-Ab、ICA、IAA联合检测对糖尿病临床分型的鉴别意义[J].山东医药，2007，47（16）：91.
[2]邢万架，张胜兰.1型DMHLA-DPBI DQBI基因与其自身抗体相关性研究[J].中华内分泌代谢杂志，2001，17（6）：338-340.
[3]朱禧星.现代糖尿病学[M].上海：上海医科大学出版社，2000：1-95.
[4]张如根，项坤三，潘晓平.IA-2抗体及GAD抗体联合检测筛查自身免疫中介1型糖尿病[J].上海医学，2001，（24）：214-216.
[5]欧阳玲莉，周智广，彭健，等.胰岛素自身抗体在诊断I型糖尿病的价值[J].中华内分泌杂志，2004，20（3）：232-233.
【关键词】糖尿病；谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）；胰岛细胞抗体（ICA）；胰岛素抗体（IAA）；酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）
糖尿病（diabetes）是一种常见且多发的内分泌系统性疾病，是一种因胰岛素分泌绝对或相对不足而引起的以高糖血症为主要特征的代谢性疾病，其患病率随着现在生活水平和生活方式的改变正逐年提高。按照1999年WHO关于DM分类及诊断建议标准，DM按照病因学主要分为T1DM和T2DM，而糖尿病患者血清中可检出多种胰岛抗体，其中T1DM患者在无症状以及发病后一段时期内体内可检出针对胰岛β细胞的自身抗体包含GADA、ICA、IAA、IA-2A等几种抗体，每一种抗体和T1DM的发生、发展密切相关。糖尿病自身抗体的联合检测可用来诊断糖尿病和不同类型的糖尿病。本文分别对T1DM和T2DM及健康人检测了GADA、ICA、IAA、IA-2A，探讨糖尿病自身抗体对T1DM的诊断和与T2DM的鉴别价值，及时对糖尿病做出早期诊断及分型，对改善患者生存质量和预后十分重要。
1资料与方法
1.1一般资料健康对照组100例，男54例，女46例；年龄20-65岁。糖尿病组286例，男166例，女120例；年龄15-76岁；其中1型糖尿病66例，2型糖尿病220例，66例1型糖尿病，有63例至少一种抗体阳性，阳性率95.40%；检测220例2型糖尿病，有36例至少一种抗体阳性，阳性率16.30%。T1DM和T2DM诊断及分类按世界卫生组织（1999年）标准。健康对照组为我院2011年健康体检者，排除心、脑、肝、肾等慢性疾病及内分泌疾患，无糖尿病家族史。
1.2标本采集所有受检人员均早晨空腹静脉采非抗凝血2ml，血清分离后，-20℃以下冻存待测。测定方法：GADA、ICA、IAA、IA-2A四种抗体的联合检测均应用深圳市伯劳特生物制品有限公司生产的糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒检测，严格按照说明书操作。
1.3统计学方法采用SPSS10.0统计软件包进行数据处理，各参数以χ±s表示，计数资料采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1T1DM和T2DM组与对照组GADA、ICA、IAA、IA-2A检测阳性率比较见表1。结果显示：T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A抗体检测均显著高于对照组P<0.05。在T1DM组，GADA分别和ICA、IAA、IA-2A比较，四种抗体的阳性率依次为GADA>ICA>IAA>IA-2A，单一抗体最高阳性率与多个抗体最高阳性率比较，P<0.05。
2.2T1DM和T2DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A检测阳性率比較见表2。结果显示：T1DM组GADA、ICA、IAA、IA-2A抗体检测阳性率明显高于T2DM组，P<0.05。
3讨论
糖尿病是内分泌科的一种常见疾病，对糖尿病的早期诊断和分型以及其治疗有着十分重要的意义。以往糖尿病的分型主要依据患者的临床表现和血清胰岛素、C肽水平，但此分型方法对成人隐匿性免疫糖尿病不容易察觉，因此具有一定的局限性。近年来，随着糖尿病免疫标志物的出现，对糖尿病的临床分型又有了新的依据[1]。
T1DM是因为胰岛β细胞自身免疫破坏所致，其自身免疫特性表现为患者外周血中存在多种针对胰岛β细胞的自身抗体。谷氨酸脱羧酶（GAD）是将谷氨酸转化成抑制神经递质r氨基丁酸（GABA）的限速酶，其抗体（GADA）是T1DM最早出现的抗体。研究发现GADA阳性在一定程度上反应β细胞损害程度较重[2]。在患者出现T1DM临床表现前数年甚至数十年就可出现，在初发T1DM患者血中阳性率可达60%-80%[3]，作为成人迟发自身免疫性糖尿病（LADA）的预测和早期诊断指标。而在T2DM和正常人血液中的阳性率很低。本文T1DM组GADA阳性率为65.33%与T2DM组的17.27%有统计学差异，说明GADA在T1DM的诊断与T2DM的鉴别方面有重要意义。可以将LADA与T2DM区别开来，为正确分型提供确切的指标，从而更好地指导治疗。
胰岛细胞抗体（ICA）是一种存在于患者血清中的免疫球蛋白，对胰岛细胞的胞桨成分产生细胞毒效应，为特异性抗体，新发的T1DM中阳性率为65%-85%，但它随着病程延长，阳性率逐渐降低，诊断后2-5年阳性率降至20%。因此对少年起病的T1DM早期有较高的诊断价值，随着病程的进展，ICA阳性率下降较快，其诊断价值明显减小。所以目前认为ICA阳性预示β细胞的自身免疫损害，只作为糖尿病的高危指标，在儿童阳性或高水平持续阳性时，对T1DM才具有较高的预测性。
胰岛素抗体（IAA）是一组与胰岛素结合的抗体，不是糖尿病的特异抗体，在胰岛素自身免疫综合征、甲状腺疾病以及部分正常人中也出现阳性。在新发T1DM儿童中阳性率达50%-70%，在新发T1DM成人患者中阳性率仅为20%-30%。IAA它绝大多数与胰岛素结合，形成抗原抗体复合物而失去生物活性，因此，它为T1DM治疗提供重要依据，也是评价药用胰岛素的理想指标。本文T1DM组IAA阳性率24.67%显著高于T2DM组12.40%（P<0.05）。
酪氨酸磷酸酶样蛋白质分子抗体（IA-2A）是由979个氨基酸组成的I型跨膜黏蛋白，代表胰岛素β细胞特异性免疫。对胰岛β细胞损害的标志性作用比GADA更具特异性。IA-2A在T1DM初诊后多年存在，对T1DM诊断价值较大。IA-2A主要与经典的T1DM相关。近年来研究表明，IA-2A与GA-DA联合检测在筛查自身免疫中T1DM有一定意义[4]。本文IA-2A的阳性率虽然没有GADA高，但据临床观察，部分IA-2A阳性而GADA阴性的患者仍为典型的T1DM，说明两抗体出现的情况并不完全重叠，联合检测有助于提高检出率。
本研究表明，GADA、ICA、IAA、IA-2A四种抗体联合检测明显高于任何单一抗体的检测（P<0.05），联合检测具有互补性，可以提高实验室的诊断率，对于糖尿病及时、准确的分型具有重要的意义。还可作为T1DM高危人群流行病学的筛选指标[5]。
参考文献
[1]武传龙，王宝燕，刘方达.GAD-Ab、ICA、IAA联合检测对糖尿病临床分型的鉴别意义[J].山东医药，2007，47（16）：91.
[2]邢万架，张胜兰.1型DMHLA-DPBI DQBI基因与其自身抗体相关性研究[J].中华内分泌代谢杂志，2001，17（6）：338-340.
[3]朱禧星.现代糖尿病学[M].上海：上海医科大学出版社，2000：1-95.
[4]张如根，项坤三，潘晓平.IA-2抗体及GAD抗体联合检测筛查自身免疫中介1型糖尿病[J].上海医学，2001，（24）：214-216.
[5]欧阳玲莉，周智广，彭健，等.胰岛素自身抗体在诊断I型糖尿病的价值[J].中华内分泌杂志，2004，20（3）：232-233.