大肠埃希菌Mn-SOD基因的克隆、表达及多克隆抗体制备

来源 :中国微生态学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zero_ak47
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目的实现Mn-SOD基因在大肠埃希菌中的高可溶性表达,制备Mn-SOD的多克隆抗体。方法用PCR方法从一株野生型大肠埃希菌(E.coli)基因组中扩增Mn-SOD基因编码区.将它克隆到原核表达载体上进行大量表达和纯化,再用纯化的蛋白对新西兰大白兔进行背部多点注射,40d后取其血清,用Western-blot印迹实验测定抗体效果。结果SDS-PAGE分析表明SOD的表达量约为细菌总蛋白的50%;黄嘌呤氧化酶法测定表达蛋白活性,结果表明每毫克菌体可溶性总蛋白中表达产物酶比活为3921.77U/mg,是对照BL
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