骨形态发生蛋白-2对人脐带间充质干细胞增殖和分化的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caisilver
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目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖和分化的影响.方法 体外培养hUCMSCs,在培养基中加入20 mg/L BMP-2,噻唑蓝(MTT)比色法观察BMP-2对hUCMSCs的增殖效果,流式细胞术检测BMP-2作用后细胞表面STRO-1的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测量BMP-2作用后hUCMSCs骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)的mRNA表达变化,碱性磷酸酶染色观察hUCMSCs在BMP-2培养基作用下ALP染色变化,Von kossa染色实验观察BMP-2对hUCMSCs钙结节的形成.结果 细胞在未加BMP-2和加BMP-2培养基中培养1、3、5、7 d,虽然细胞的增殖率上升,但各组间比较差异无统计学意义(P>0.05),同时发现在2%血清的培养基中培养7 d后,hUCMSCs的增殖促进约10%左右.BMP-2培养7 d后细胞表面STRO-1阳性细胞比例上升明显,由25.1±4.0上升至51.1±6.4,差异有统计学意义(P<0.01).BMP-2培养条件下COL1 mRNA的表达增强,差异有统计学意义(P<0.05),OPN mRNA出现表达,ALP mRNA比无BMP-2培养明显增强,差异有统计学意义(P<0.05).在BMP-2培养条件下ALP染色出现大片细胞阳性染色.在培养28 d,Von kossa染色出现明显的钙结节.结论 BMP-2对hUCMSCs成骨诱导分化作用明显,而增殖作用很弱。

其他文献
目的 探讨通过"自组装"(Self-Assembly)培养技术,以生长分化因子-5(GDF-5)诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs),分化形成软骨组织的可能性及效果.方法 将第3代hMSCs用含GDF-5的软骨诱导液定向诱导培养.3周后重悬细胞,自组装培养.对自组装组织团块经行大体观察、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、软骨相关染色检测.结果 自组装组织团块有类似于软骨的外观,Ⅱ