柔嫩艾美耳球虫rhomboid抗原基因在卡介苗中的克隆与表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zmjmengm1988

【摘要】

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以含柔嫩艾美耳球虫rhomboid基因的重组质粒为模板，应用PCR方法扩增该基因完整开放阅读框，克隆至pMD18-T载体中。分别用限制性内切酶PstⅠ／ClaⅠ和PvUⅡ／ClaⅠ进行双酶切，将rhombo

【作者】

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王秋悦任科研宫鹏涛李建华张西臣

【机构】

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吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林省兽医科学研究所

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2009年4期

【关键词】

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柔嫩艾美耳球虫 rhomboid基因 rBCG 球虫病疫苗 Eimeria tenella rhomboid gene recombinant BCG c

【基金项目】

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国家自然科学基金（30500370）,吉林省科技发展计划项目（20050211-2）

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以含柔嫩艾美耳球虫rhomboid基因的重组质粒为模板，应用PCR方法扩增该基因完整开放阅读框，克隆至pMD18-T载体中。分别用限制性内切酶PstⅠ／ClaⅠ和PvUⅡ／ClaⅠ进行双酶切，将rhomboid目的基因克隆到大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中，获得重组质粒pRho-261和pRho-361。将重组质粒电穿孔转化卡介苗，经热诱导后对其表达产物进行SDS—PAGE和western blot分析。结果表明成功构建了两个重组质粒，其表达产物与柔嫩艾美耳球虫阳性血

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