【摘 要】
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【目的】鼠伤寒沙门菌（STM）是一种可感染人和多种动物的重要人兽共患病原菌，故有必要研究STM小RNA（sRNA）STnc290基因的分子特征和在细菌的细胞侵染及小鼠致病性中的作用。【方法】通过PCR扩增STM sRNA STnc290基因，并利用生物信息学软件分析STnc290基因的序列特征、二级结构分子特征及预测潜在靶基因。同时，利用λ-Red同源重组系统构建STnc290基因缺失株及回补株；
【基金项目】
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国家重点研发计划子课题（2016YFD0500900）；
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【目的】鼠伤寒沙门菌（STM）是一种可感染人和多种动物的重要人兽共患病原菌，故有必要研究STM小RNA（sRNA）STnc290基因的分子特征和在细菌的细胞侵染及小鼠致病性中的作用。【方法】通过PCR扩增STM sRNA STnc290基因，并利用生物信息学软件分析STnc290基因的序列特征、二级结构分子特征及预测潜在靶基因。同时，利用λ-Red同源重组系统构建STnc290基因缺失株及回补株；通过分析STM-SL1344、STM-ΔSTnc290及ΔSTnc290/STnc290在侵染细胞、小鼠半数致死剂量、小鼠存活率、致病小鼠肝脾载菌量和小鼠肝脾病理变化差异，利用qRT-PCR检测STnc290基因调控的潜在靶基因转录水平。【结果】sRNA STnc290基因大小为79 bp,其上游序列含有-10 box和-35 box的启动子核心序列TGATATATA和CTGACA,并且还存在σ因子rpoD16结合位点AAATAATT;STnc290基因的二级结构含有典型的茎环结构；通过在线软件预测发现STnc290基因2个潜在的靶基因为pqaA和narX基因。STM-SL1344、STM-ΔSTnc290及ΔSTnc290/STnc290菌株生长测定显示，与STM-SL1344和ΔSTnc290/STnc290回补株相比，STnc290基因缺失株在生长特性上无明显差异（P＞0.05）;与STM-SL1344株相比，STM-ΔSTnc290对小鼠巨噬细胞RAW264.7的黏附、侵袭能力均显著减弱（P＜0.05）;STM-ΔSTnc290株感染小鼠半数致死剂量显著升高（P＜0.05）;STM-ΔSTnc290株感染的小鼠存活率显著高于亲本株（P＜0.05）;STM-ΔSTnc290株感染小鼠肝脾载菌量在感染后第7、9天显著降低（P＜0.05）。qRT-PCR检测表明，STnc290基因缺失株靶基因pqaA和narX转录水平均显著下调（P＜0.05）。【结论】sRNA STnc290对STM侵染细胞及小鼠致病性具有重要的调控作用。
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