甘肃金鳟RAPD反应体系构建及优化

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以甘肃金鳟尾鳍为试验材料,提取基因组DNA。对影响甘肃金鳟RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,包括模板DNA浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq酶、变性时间、退火温度等,建立了甘肃金鳟RAPD反应的最适体系。即在25一反应体系中:模板DNA用量为4.0ng/pd;Mg^2+浓度为2.5mmol/L;dNTP浓度为0.5mmol/L;引物浓度为0.5μmol/L;Taq酶用量为1U;扩增程序:94℃预变性4min,94℃变性45s,36℃退火50s,72℃延伸1min,共35个循环,最后延伸10min。
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