论文部分内容阅读
1 蛋黄抗体
蛋黄抗体是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白。科学家在鸟类的血液循环里发现三种免疫球蛋白（IgG、IgA与IgM），母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。比较特别的是，在成熟期中，血清IgG会经蛋黄薄膜转移到蛋黄中，蛋黄的IgG与哺乳类的IgG在分子量、等电点、细胞膜上Fc受质的键结构上存在着相异点而被特定称为IgY。
产蛋母鸡经用特定的抗原反复数次免疫后，体内可产生较高滴度的特异性抗体，并同时储存于卵黄中，其有效成分即称蛋黄抗体，可以预防和治疗相对应的疾病。对鸡最常用于传染性法氏囊病，在此病的发病早期应用效果较明显，尤其对变异株或不同亚型等株引起的发病，如能从当地发病鸡采集法氏囊制成囊组织灭活疫苗，用这种疫苗经数次免疫的鸡所产的鸡蛋，制成的蛋黄抗体液，用于防治当地的鸡法氏囊病，可以取得良好的效果。蛋黄抗体液还具有成本低，制作工艺简单的优势，在对鸡新城疫、禽流感、鸡传染性喉气管炎等病的防治时也有应用。
蛋黄抗体精制抗体必须解决两个问题，一是彻底灭活技术，二是大规模生产的萃提技术和工艺流程及其相配套的一系列检验、检测等。目前有学者研究精制抗体的生产工艺灭活技术获得成功，萃提采取酸化法，结合离心、超滤、除菌等，获得了可供注射用的精制蛋黄抗体。精制蛋黄抗体必须经过无菌检验、安全检验、效力检验才能进入市场。精制蛋黄抗体有如下特点：安全，不具备垂直传播病原的危险、不产生应激反应，对注射部位没有刺激。不损伤法氏囊，无免疫抑制。使用方便，易于保存（可常温保存和低温保存）。注射后3～6小时，抗体即被吸收入血，开始发挥效能，中和相应的病毒、细菌或毒素，中止病原对机体的危害，缓解症候，恢复健康。注射一次有效持续期为5～7天。精制蛋黄抗体有效期为冰箱保存（4～8℃），有效期至少2年以上。室溫保存，有效期为11个月。避光保存为宜。
2 提取方法与应用
利用新城疫康复鸡所产的蛋试制高免蛋黄液，并用聚乙二醇6 000提取蛋黄抗体液，用于控制鸡新城疫，效果较好。
康复鸡只选择。蛋鸡按免疫程序，于55日龄、110日龄用新城疫（ND）Ⅰ系疫苗和鸡新城疫油剂灭活疫苗接种，到190日龄突发以呼吸道哕音为主要症状的鸡新城疫，产蛋率下降10%。用NDⅠ系疫苗3倍量和鸡新城疫油剂灭活疫苗1毫升/只，分别肌肉注射，第7天后死亡停止，死亡率3.1%，全群鸡采食量增加，产蛋率回升，至229日龄产蛋率达95%。从鸡群中挑出发病后康复的并且鸡白痢杆菌、支原体全血平板凝集试验全部阴性的高产鸡，隔离饲养，加喂抗生素和电解多维，适应3天，收集所产蛋备用。
蛋黄抗体液制备。将收集的鸡蛋洗净，用0.5%福尔马林浸泡消毒20分钟，取出晾干，无菌分离蛋黄，加2.5倍的生理盐水稀释，再按每500毫升蛋黄液加50毫升25%聚乙二醇6 000，8 000转/分匀浆3分钟，倒入玻璃缸内，置0～4℃冰箱内8～12小时，取出，这时蛋黄液变为两层：上层为黏稠的脂蛋白，下层为含免疫抗体的清液，用虹吸法取出下层清液，装瓶，加青霉素、链霉素2 000单位/毫升，即为蛋黄抗体液，体积为原蛋黄液的55%左右。
无菌检验。取成品蛋黄抗体液0.2毫升，接种于普通营养琼脂培养基和厌气肉汤培养基，37℃培养48小时，无细菌生长。
安全检验。选择体重0.5千克蛋公鸡，肌肉注射蛋黄抗体液2毫升/只，观察一星期，未见异常反应。
临床应用体会。用ND康复鸡蛋制备的蛋黄抗体液，紧急控制ND发病鸡群。对ND发病鸡群，立即肌注蛋黄抗体液1～3毫升/只，一般2～3天即可控制死亡，效果明显。之后，3～5天或据ND抗体监测结果，再接种鸡新城疫Ⅰ系或弱毒疫苗，同时配合新城疫油剂灭活疫苗，使机体内免疫抗体保持一致持久，内服抗生素和电解多维，预防继发感染，增强机体抗病力。蛋黄抗体液应冻结保存，零下5℃保存半年，零下10～15℃保存一年，效价不变，解冻后稍有沉淀，振摇即可使用，切勿将沉淀弃掉；忌反复冻融，否则会降低效价，影响防制效果。
蛋黄抗体是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白。科学家在鸟类的血液循环里发现三种免疫球蛋白（IgG、IgA与IgM），母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。比较特别的是，在成熟期中，血清IgG会经蛋黄薄膜转移到蛋黄中，蛋黄的IgG与哺乳类的IgG在分子量、等电点、细胞膜上Fc受质的键结构上存在着相异点而被特定称为IgY。
产蛋母鸡经用特定的抗原反复数次免疫后，体内可产生较高滴度的特异性抗体，并同时储存于卵黄中，其有效成分即称蛋黄抗体，可以预防和治疗相对应的疾病。对鸡最常用于传染性法氏囊病，在此病的发病早期应用效果较明显，尤其对变异株或不同亚型等株引起的发病，如能从当地发病鸡采集法氏囊制成囊组织灭活疫苗，用这种疫苗经数次免疫的鸡所产的鸡蛋，制成的蛋黄抗体液，用于防治当地的鸡法氏囊病，可以取得良好的效果。蛋黄抗体液还具有成本低，制作工艺简单的优势，在对鸡新城疫、禽流感、鸡传染性喉气管炎等病的防治时也有应用。
蛋黄抗体精制抗体必须解决两个问题，一是彻底灭活技术，二是大规模生产的萃提技术和工艺流程及其相配套的一系列检验、检测等。目前有学者研究精制抗体的生产工艺灭活技术获得成功，萃提采取酸化法，结合离心、超滤、除菌等，获得了可供注射用的精制蛋黄抗体。精制蛋黄抗体必须经过无菌检验、安全检验、效力检验才能进入市场。精制蛋黄抗体有如下特点：安全，不具备垂直传播病原的危险、不产生应激反应，对注射部位没有刺激。不损伤法氏囊，无免疫抑制。使用方便，易于保存（可常温保存和低温保存）。注射后3～6小时，抗体即被吸收入血，开始发挥效能，中和相应的病毒、细菌或毒素，中止病原对机体的危害，缓解症候，恢复健康。注射一次有效持续期为5～7天。精制蛋黄抗体有效期为冰箱保存（4～8℃），有效期至少2年以上。室溫保存，有效期为11个月。避光保存为宜。
2 提取方法与应用
利用新城疫康复鸡所产的蛋试制高免蛋黄液，并用聚乙二醇6 000提取蛋黄抗体液，用于控制鸡新城疫，效果较好。
康复鸡只选择。蛋鸡按免疫程序，于55日龄、110日龄用新城疫（ND）Ⅰ系疫苗和鸡新城疫油剂灭活疫苗接种，到190日龄突发以呼吸道哕音为主要症状的鸡新城疫，产蛋率下降10%。用NDⅠ系疫苗3倍量和鸡新城疫油剂灭活疫苗1毫升/只，分别肌肉注射，第7天后死亡停止，死亡率3.1%，全群鸡采食量增加，产蛋率回升，至229日龄产蛋率达95%。从鸡群中挑出发病后康复的并且鸡白痢杆菌、支原体全血平板凝集试验全部阴性的高产鸡，隔离饲养，加喂抗生素和电解多维，适应3天，收集所产蛋备用。
蛋黄抗体液制备。将收集的鸡蛋洗净，用0.5%福尔马林浸泡消毒20分钟，取出晾干，无菌分离蛋黄，加2.5倍的生理盐水稀释，再按每500毫升蛋黄液加50毫升25%聚乙二醇6 000，8 000转/分匀浆3分钟，倒入玻璃缸内，置0～4℃冰箱内8～12小时，取出，这时蛋黄液变为两层：上层为黏稠的脂蛋白，下层为含免疫抗体的清液，用虹吸法取出下层清液，装瓶，加青霉素、链霉素2 000单位/毫升，即为蛋黄抗体液，体积为原蛋黄液的55%左右。
无菌检验。取成品蛋黄抗体液0.2毫升，接种于普通营养琼脂培养基和厌气肉汤培养基，37℃培养48小时，无细菌生长。
安全检验。选择体重0.5千克蛋公鸡，肌肉注射蛋黄抗体液2毫升/只，观察一星期，未见异常反应。
临床应用体会。用ND康复鸡蛋制备的蛋黄抗体液，紧急控制ND发病鸡群。对ND发病鸡群，立即肌注蛋黄抗体液1～3毫升/只，一般2～3天即可控制死亡，效果明显。之后，3～5天或据ND抗体监测结果，再接种鸡新城疫Ⅰ系或弱毒疫苗，同时配合新城疫油剂灭活疫苗，使机体内免疫抗体保持一致持久，内服抗生素和电解多维，预防继发感染，增强机体抗病力。蛋黄抗体液应冻结保存，零下5℃保存半年，零下10～15℃保存一年，效价不变，解冻后稍有沉淀，振摇即可使用，切勿将沉淀弃掉；忌反复冻融，否则会降低效价，影响防制效果。