永生型骨髓间质干细胞体外诱导为心肌样细胞的实验研究

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目的 采用骨髓间质干细胞体外诱导为心肌细胞,为心力衰竭的干细胞移植治疗提供新的细胞材料.方法抽取贵州香猪骨髓液3 ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞,连续传代4个月,得到永生型细胞,经5-氮胞苷(5-azacytidine)刺激后,进行RT-PCR,基因测序,免疫组化,电镜超微结构鉴定.结果骨髓间质干细胞经5-氮胞苷刺激后,部分细胞呈梭形.RT-PCR,基因测序结果表明细胞有心房利钠肽(ANP),脑利钠肽(BNP),心肌特异性肌球蛋白重链(cardiac-MHC),β肌球蛋白重链(beta-MHC),α骨骼肌肌动蛋白(α-skeletal actin)表达,结蛋白(desmin),肌球蛋白重链(MHC),心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ(cTnT Ⅰ)免疫组化阳性.电镜示梭形细胞有明显的肌丝,细胞核呈单椭圆形,位于细胞中央.结论骨髓间质干细胞经5-氮胞苷刺激后,从基因,蛋白,超微形态上已有心肌细胞特点,表明在体外环境下可向心肌细胞转化,有望成为心力衰竭干细胞移植治疗的细胞材料。

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