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将质粒pKSHNC利用BamHI和XbaI双酶切后回收。将转座载体pFast BacI同样方法酶切、回收。将回收的HNC与pFast BacI连接，使目的基因亚克隆到pFast BacI上的ocu 基因启动子下游的MCS上，然后转化E.coli DH5 α, 以LB/AMP+GM平板筛选阳性重组子，经酶切鉴定，再转化至 E.coli DH10 Bac感受态细胞中，经抗性培养和蓝白斑筛选，挑取白色菌落为阳性重组表达载体，经酶切鉴定后，命名为Bacmid HNC。经小量提取后，转染sf-9细胞，27 ℃培养7