RNF31表达下调抑制TNF-α刺激的NF-κB通路的激活

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sym409198933

【摘要】

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目的：利用慢病毒干涉下调内源性RNF31表达，研究NF-κB通路的活化及对细胞凋亡的影响。方法将人RNF31的shRNA片段克隆到慢病毒表达载体pGreenPuro中，瞬时转染HEK293T细胞，筛选出有

【作者】

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陈洁陈慧詹轶群杨晓明于淼

【机构】

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天津大学制药工程专业,军事医学科学院放射与辐射医学研究所

【出处】

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南方医科大学学报

【发表日期】

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2014年12期

【关键词】

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E3泛素连接酶RNF31 慢病毒转录调节 E3 UBIQUITIN LIGASE RNF31 NF-κB lentivirus nuclear factor-

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目的：利用慢病毒干涉下调内源性RNF31表达，研究NF-κB通路的活化及对细胞凋亡的影响。方法将人RNF31的shRNA片段克隆到慢病毒表达载体pGreenPuro中，瞬时转染HEK293T细胞，筛选出有效的干涉片段。将重组表达质粒与包装质粒PMD、SPA共转染293T细胞，在24 h、48 h分2次收集慢病毒上清，用流式细胞术检测病毒滴度。将获得的病毒感染HEK293细胞，提取细胞蛋白，Real-time PCR以及Western Blot检测RNF31干涉效果；报告基因实验检测敲低RNF31对NF-κ

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