基于脂质组学的去甲斑蝥酸钠对LO2肝细胞脂代谢影响的研究

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采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)进行脂质组学检测,通过多元统计分析方法研究去甲斑蝥酸钠(NCTD-Na)对人正常肝细胞LO2损伤时内源性脂质代谢的变化,寻找NCTD-Na体外肝损伤的内源性潜在生物标志物,以阐释NCTD-Na肝损伤的作用机制。结果显示NCTD-Na的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为0.034 mmol·L-1;对照组与低剂量给药组比较,满足VIP> 2.0且P<0.05的共有280个差异代谢物;对照组与高剂量给药组比较,满足VIP> 2.0且P<0.05的共有273个差异代谢物。对照组、低、高剂量给药组细胞代谢物谱得到明显分离,3组进行比较,满足VIP> 2.0,P<0.05,RSD <30%同时符合量效关系的差异代谢物共111个。经前处理方法和数据库搜索分析,发现以上差异代谢物大多为脂类代谢物,该研究共鉴定了32个潜在生物标志物,包括磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC) 3个、溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,Lyso PC) 5个、神经酰胺(ceramide,Cer) 3个、鞘磷脂(sphingomyelin,SM) 1个、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE) 1个、溶血磷脂酰乙醇胺(lysophosphatidylethanolamine,LysoPE) 10个、二酰基甘油(diacylglycerol,DG) 4个、磷脂酸(phosphatidic acid,PA) 1个、溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,Lyso PA) 1个、磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerol,PG) 1个、脂肪酸羟基脂肪酸(fatty acid hydroxy fatty acid,FAHFA) 1个和磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS) 1个。PC,Cer,SM,PE,DG的变化与其保护肝脏功能、肝细胞中DNA的甲基化及自我修复、细胞凋亡、致癌物质的转甲基化和解毒作用及过氧化脂质生成过程密切相关,且对肝细胞的增殖、分化及基因转录调节失调有影响;细胞被NCTDNa刺激后将从多种途径促进PA的生成和FAHFA合成和分解代谢发生变化;Lyso PC,LysoPE,Lyso PA的水平与PC,PE,PA相关;PE和PS在凋亡过程中外翻,可触发吞噬的产生。
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