应用抑制性消减杂交技术筛选NS5ATP5的上调基因

来源 :胃肠病学和肝病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JK0803_zhoukaijun
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目的通过抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A反式激活蛋白5(NS5ATP5)的反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库,筛选HCVNS5ATP5蛋白反式激活靶基因.方法以HCV NS5ATP5表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5ATP5转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并合成cDNA,经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与
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