【摘 要】
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目的:探讨蛋白磷酸酶2A催化亚基Cα(PP2Acα)的抑制是否会影响胃癌细胞的恶性表型,以及维尔姆肿瘤1相关蛋白(Wilms\' tumour 1-associating protein,WTAP)在这一进展中的表达.方法:使用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分别比较PP2Acα编码基因(PPP2CA)、WTAP基因在胃癌组织与正常胃黏膜组织中的表达量;使用KM-plot网站(http://kmplot.com/analysis/)分析PPP2CA、WT
【机 构】
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南京医科大学附属江宁医院普通外科,江苏南京211100;南京医科大学附属江宁医院中心实验室,江苏南京211100
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目的:探讨蛋白磷酸酶2A催化亚基Cα(PP2Acα)的抑制是否会影响胃癌细胞的恶性表型,以及维尔姆肿瘤1相关蛋白(Wilms\' tumour 1-associating protein,WTAP)在这一进展中的表达.方法:使用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分别比较PP2Acα编码基因(PPP2CA)、WTAP基因在胃癌组织与正常胃黏膜组织中的表达量;使用KM-plot网站(http://kmplot.com/analysis/)分析PPP2CA、WTAP与胃癌预后的关系;使用慢病毒介导的短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)在胃癌细胞中敲减PPP2CA,从而抑制PP2Aeα的表达;随后提取RNA、蛋白分别进行定量逆转录PCR(quantitative reverse tran-scription PCR,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot),检测PPP2CA、WTAP的mRNA水平及蛋白的表达;最后在离体与活体层面观察抑制PP2Aeα对于胃癌细胞恶性表型的影响.结果:抑制PP2Acα后,胃癌细胞发生上皮间质转化(epithelial-mesen-chymal transition,EMT)形态改变,且增殖、迁移与侵袭能力均得到了增强,并伴随着WTAP蛋白及mRNA水平的显著升高.结论:抑制PP2Acα促进胃癌细胞的恶性表型,可能是通过上调WTAP的表达水平实现的.
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