RNA干扰技术阻断小鼠巨噬细胞受体相互作用蛋白2表达的实验研究

来源 :中华内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyy_2009
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目的 观察阻断受体相互作用蛋白2(Rip2)对巨噬细胞产生炎症细胞因子的影响,以及对内毒素血症小鼠的保护作用。方法 构建Rip2小干扰RNA(siRNA)重组表达质粒,转染细胞后RT-PCR和Western blot检测Rip2的mRNA和蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖水平,脂多糖(LPS)刺激后,测定TNFα和高迁移率组蛋白1(HMGB1)的水平。Rip2 siRNA质粒转染小鼠后,观察小鼠病死率,测定血清TNFα水平和肝组织Rip2和HMGB1表达。结果 Rip2 siRNA表达质粒可阻断Rip2mRNA和蛋白表达。Rip2阻断的细胞增殖明显,LPS刺激后产生TNFα、HMGB1减少;Rip2阻断的小鼠生存率较其他组高(P<0.05),肝组织中HMGB1[(40.21±11.03)pg/g]表达和血清TNFα[(300.43±59.26)ng/L]水平均较其他组低(P<0.05)。结论 Rip2 siRNA表达质粒可阻断Rip2的表达,从而减少TNFα、HMGB1等炎症细胞因子的产生,降低小鼠内毒素血症的病死率。

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