黄地老虎颗粒体病毒启动基因功能研究

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黄地老虎颗粒体病毒(ASGV)0.9kb的启动基因片段,经BAL31核酸外切酶修饰,DNA聚合酶1大片段补平,克隆到大肠杆菌启动子探测质粒PKK232-8SmaⅠ位点,得到抗氯霉素转化子,其中一株可抗氯霉素1500μg/nd。核苷酸序列分析证实,其长度为571bp,5’端被删除258bp,3’端被删除150bp,启动功能没变,删除后的571bp内含相似于杆状病毒蛋白基因启动子的14bP保守序列(TAAATTAAGT-TAAT)和增强子的核心序列-ACTC-,-GCTC-。 The 0.9 kb promoter fragment of Tiger Granuloviridae (ASGV) was amplified by BAL31 exonuclease and cloned into a large fragment of DNA polymerase and cloned into the promoter region of PKK232-8SmaⅠ, Chloramphenicol transformants, one of which is resistant to chloramphenicol 1500 μg / nd. Nucleotide sequence analysis confirmed that its length is 571bp, 258bp deleted at the 5 ’end and 150bp deleted at the 3’ end. The function of the promoter was unchanged. The deleted 571bp contained a 14bP conserved sequence similar to that of the baculovirus protein gene promoter (TAAATTAAGT-TAAT) and enhancer core sequences - ACTC -, - GCTC-.
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