地中海贫血“integration-free”诱导多能干细胞的建立及造血分化的研究

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbyyqq555
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目的:建立无外源基因整合( integration-free)的地中海贫血患者特异诱导多能干细胞( induced plu-ripotent stem cells,iPSC),并研究其向造血前体细胞分化的可能性。方法:用核转染的方法将表达Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc和Lin28转录因子的质粒pEB-C5以及表达SV40大T抗原的质粒pEB-Tg导入引产巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞中,将其重编程为iPSC后检测其向3个胚层细胞分化的特性。将iPSC细胞与小鼠OP9细胞共培养向造血前体细胞诱导分化,检测造血前体细胞特异性抗原。结果:成功建立了巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞来源的α地中海贫血患者特异iPSC系,其具有向3个胚层分化的能力,与OP9细胞共培养9 d后可检测到造血前体细胞标记CD34的阳性率为18.7%, CD34和CD45双阳性为12.2%。结论:巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞可成功诱导成“integra-tion-free”iPSC,该细胞系具有向3个胚层分化的能力,与OP9共培养可向造血前体细胞分化。
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