黄芩对肺炎克雷伯菌抑制作用及其机制研究

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目的观察黄芩对肺炎克雷伯菌的抑制作用,分析其抗菌机制,为寻找治疗肺炎克雷伯菌感染新途径提供实验依据。方法制备黄芩药液,以多重耐药肺炎克雷伯菌为试验菌株,采用试管法测定黄芩液对细菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);通过细菌生长曲线和生物膜形成情况评价黄芩液对细菌生长的影响。不同浓度黄芩液作用后,取培养液上清进行电导率和碱性磷酸酶活性测定,分析其对细菌细胞膜通透性的影响;采用细菌沉淀荧光法进行核酸DNA和RNA含量及SDS-PAGE蛋白谱带定量分析;提取DNA拓扑异构酶,进行相关生物学活性测定,分析其对细菌合成的影响。结果黄芩液对肺炎克雷伯菌的MIC和MBC分别为(32±2.2)mg/ml和(64±3.6)mg/ml。不同浓度黄芩液均可抑制肺炎克雷伯菌生长和细胞生物膜形成,使细胞膜通透性增加。黄芩液作用24h后肺炎克雷伯菌菌体蛋白、DNA和RNA减少。黄芩能抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ活性,且呈浓度依赖。结论黄芩可通过抑制肺炎克雷伯菌生物膜形成抑制其生长,通过增加细胞膜通透性和抑制细菌DNA拓扑异构酶活性,进而抑制细菌核酸和蛋白合成,发挥抑制细菌繁殖和侵袭作用。
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