水稻染色体的显微分离与克隆

来源 :南开大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwe136172081
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对水稻染色体识别、显微分离与切割、PCR体外扩增和微克隆进行了研究.利用改进的显微切割装置,可以在100×油镜下进行染色体分离与微切割,不仅解决了水稻染色体的识别和显微分离的困难,而且可使染色体特定区微切片段缩小到7Mb级;利用SUP-PCR可使fg级水稻染色体DNA扩增到μg级.电泳检测结果表明,扩增片断在80~600bp左右,经与pUC19连接,转化大肠杆菌DH5a,一次分离的单条水稻染色体可以获得9×104克隆,一个7Mb级片段可以获得3×104克隆,经分析,插入片段大小在80~500bp范围.该方法为直接从水稻单条染色体或染色体特定区DNA文库中筛选分子标记奠定了基础.
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