【摘 要】
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为了研究大菱鲆谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)基因的序列特征以及其对鳗弧菌金属蛋白酶胁迫后的响应.本试验首次采用RACE技术克隆大菱鲆GPx1基因cDNA全长序列,结果表明,该序列全
【机 构】
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河北科技师范学院动物科技学院,河北秦皇岛066004
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为了研究大菱鲆谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)基因的序列特征以及其对鳗弧菌金属蛋白酶胁迫后的响应.本试验首次采用RACE技术克隆大菱鲆GPx1基因cDNA全长序列,结果表明,该序列全长975 bp,其中5'和3'非编码区分别是200和346 bp,开放阅读框为429 bp,编码142个氨基酸残基组成的蛋白质,预测相对分子质量为16.30 kDa,理论等电点为7.20.同源性分析显示,大菱鲆GPx1氨基酸序列与与棘头梅童鱼同源性最高为85.2％;系统进化分析表明,大菱鲆GPx1与底鳉和攀鲈GPx1聚为一支.荧光定量PCR结果表明,GPx1基因在大菱鲆的心脏、肝脏、肾脏、胃、肌肉、肠和鳃中均有表达,其中在肝脏中表达量最高,在肌肉中表达量最低.注射金属蛋白酶后大菱鲆肝脏中GPx1在6～48 h显著低于对照组(P＜0.05),而头肾组织中GPx在3和48 h均显著高于对照组(P＜0.05),在12～24 h显著低于对照组(P＜0.05);酶活试验结果显示,金属蛋白酶胁迫后大菱鲆肝脏和头肾组织GPx活力分别在6和3 h显著高于对照组(P＜0.05),而在12～72 h均显著低于对照组(P＜0.05).脂质过氧化物MDA在肝脏和头肾组织中分别于6～72 h和12～72 h显著高于对照组(P＜0.05),上述结果首次表明大菱鲆GPx1基因在鳗弧菌金属蛋白酶胁迫过程中发挥重要作用.
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