【摘 要】
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表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定.设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列.运用重叠延伸PCR,
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表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定.设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列.运用重叠延伸PCR,连接可变区与恒定区,将轻、重链基因连接至pIRES双表达载体.将质粒以阳离子脂质体转染CHO细胞,ELISA挑选阳性克隆,共获得7株表达较高的克隆,表达量约为2mg/L.扩大培养阳性克隆anti-CD20-1B3,收获上清,以蛋白A进行亲和层析纯化表达蛋白.SDS-PAGE检测表明纯化纯度达到95%,蛋白相对分子量与理论值吻
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