【摘 要】
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目的 观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胃癌发生、发展中的作用；构建MMP-9基因沉默质粒；建立MMP-9基因沉默的BGC823细胞.方法 采用免疫组织化学法在46例人胃癌新鲜标本中检测MMP-9的蛋白表达水平,采用化学合成的方法合成3条沉默MMP-9的寡聚核苷酸序列,插入到短发卡RNA (shRNA)表达载体pGenesil上,运用荧光显微镜、明胶酶电泳、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
【机 构】
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361003厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心肿瘤外科福建医科大学第一临床医学院,361003厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心肿瘤外科福建医科大学第一临床医学院,361003厦门大学附属第一医院厦门
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目的 观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胃癌发生、发展中的作用；构建MMP-9基因沉默质粒；建立MMP-9基因沉默的BGC823细胞.方法 采用免疫组织化学法在46例人胃癌新鲜标本中检测MMP-9的蛋白表达水平,采用化学合成的方法合成3条沉默MMP-9的寡聚核苷酸序列,插入到短发卡RNA (shRNA)表达载体pGenesil上,运用荧光显微镜、明胶酶电泳、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测3条质粒的沉默效率；选取沉默效率最佳的1个质粒转染BGC823进行稳定细胞株的筛选及鉴定.结果 46例胃癌组织MMP-9蛋白阳性率为100％,其中57％(26/46)呈增强表达；筛选到1条MMP-9沉默最为显著的shRNA表达质粒；成功构建MMP-9基因沉默的BGC823胃癌细胞克隆.结论 MMP-9基因在胃癌发生、发展及浸润、转移过程中可能扮演重要角色。
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