用衔接头PCR克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:silvercup
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为克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子,将胡萝卜基因组DNA分别用PvuⅡ、EcoR Ⅴ、Dra I和SmaI酶切,酶切片段与一特殊的衔接头连接.取连接产物作模板,以衔接头引物和基因特异引物做PCR,得到的主要PCR产物分别为3.4kb、1.3kb、0.4kb和0.6kb.将EcoR Ⅴ-衔接头体系的PCR产物克隆和测序,并将其序列与GenBank中的已知序列进行比较分析,发现了一个新的胡萝卜Ⅱ型转化酶启动子序列,它含有类似于TATA box和CAAT boX的元件,在启动子的远上游区域还含有多个AT富含区.该启动子的发现对于研究植物中糖代谢具有重要意义.
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