水泡性口炎病毒核蛋白基因的表达及初步应用

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mazd88

【摘要】

：

将水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因片段克隆至pMD18-T克隆载体质粒中，构建N基因克隆重组质粒，进行核苷酸序列分析。然后亚克隆插入pBAD／Thio TOP0表达载体，经PCR限制性内

【作者】

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花群义金宁一徐自忠杨云庆董俊杨晶焰周晓黎

【机构】

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云南出入境检验检疫局技术中心,解放军军需大学军事兽医研究所

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

：

水泡性口炎病毒核蛋白基因克隆表达 vesicular stomatitis virus nucleocapsid (N) protein gene e

【基金项目】

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国家“十五”重大科技攻关项目 (No .2 0 0 1BA80 4A2 2 ),,云南省自然科学基金资助项目 (No.2 0 0 2C0 0 72M),,昆明市科技计划项目 (昆科 (农 )字 2 0 0 2 0 2 0 0 3 )~~

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将水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因片段克隆至pMD18-T克隆载体质粒中，构建N基因克隆重组质粒，进行核苷酸序列分析。然后亚克隆插入pBAD／Thio TOP0表达载体，经PCR限制性内切酶分析、测序鉴定，筛选获得N基因正向插入、有正确读码框的阳性克隆，成功构建了水泡性口炎病毒N基因重组表达载体。经L-Arabinose诱导表达，可稳定、高效地表达N蛋白抗原。SDS-PAGE：Western blotting及间接ELISA试验结果表明，表达蛋白为融合蛋白，质量约63．5kD，其表达产量约占菌体总蛋

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