猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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通过RT-PCR方法从用PHA和LPS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素18(pIL-18)成熟蛋白基因的cDNA,克隆到T载体pUCm-T后,序列测定表明,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为474 bp,编码157个氨基酸.将该基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET-28 a构建重组质粒pETIL18m,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导.重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量为19 000的重组蛋白,免疫印迹法证实该重组蛋白可以与人IL-18单抗发生特异性免疫反应.
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