【摘 要】
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目的构建人p43/AIMP1蛋白与谷胱甘肽转移酶（GST）重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达纯化,通过GST-pulldown方法验证其与神经中间丝轻链（NF-L）的体外直接相互作用。方法以重组
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院神经科,中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所
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目的构建人p43/AIMP1蛋白与谷胱甘肽转移酶（GST）重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达纯化,通过GST-pulldown方法验证其与神经中间丝轻链（NF-L）的体外直接相互作用。方法以重组质粒pcDNA3.1-p43为模板,扩增p43/AIMP1基因,产物经纯化回收后与原核表达载体pGEX4T-1连接构建成新载体GST-p43/AIMP1,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌BL21（DE3）,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达,并纯化获得目的蛋白;将myc-NF-L体外转染HEK
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