【摘 要】
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目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)是否诱导人肺腺癌A549细胞发生自噬。方法吖啶橙(AO)荧光染色和透射电镜观察自噬泡的变化;细胞免疫化学法测定LC3-Ⅱ的表达;流式细胞术及吖啶橙染色
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目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)是否诱导人肺腺癌A549细胞发生自噬。方法吖啶橙(AO)荧光染色和透射电镜观察自噬泡的变化;细胞免疫化学法测定LC3-Ⅱ的表达;流式细胞术及吖啶橙染色结合激光扫描共焦显微镜检测细胞凋亡;DNA电泳检测凋亡梯形条带的产生。结果吖啶橙荧光染色和透射电镜观察结果显示,5-氟尿嘧啶处理细胞后,细胞质中均出现明显的自噬泡;细胞免疫化学法的结果显示,5-氟尿嘧啶处理细胞后,细胞质中LC3-Ⅱ的表达明显升高,且3-甲基腺嘌呤(3-MA)能明显抑制LC3-Ⅱ的升高;流式细胞术、吖啶橙染色和DNA ladder结果表明,5-氟尿嘧啶处理细胞后,细胞未发生凋亡。结论低浓度(5μmol/L)的5-氟尿嘧啶能诱导A549细胞发生自噬而非凋亡,自噬特异性抑制剂3-MA能明显抑制细胞自噬的发生。
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