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针对除草剂敏感型乙酰羟基酸合成酶E. coli AHAS II的抗性域,引入W464A、W464F、W464L、W464Y点突变.采用Megaprimer PCR定点突变,测序鉴定,构建了4个E. coli AHAS IIW464位点的突变体.通过对E. coli AHAS II野生型及突变体动力学性质的测定,发现它们对于底物-丙酮酸及3种辅助因子(FAD、ThDP、Mg2+)有着不同的特征常数.这些部分抗性酶系的建立以及对动力学性质的系统研究,为探讨AHAS酶对农药分子抗性的作用机制、设计合成新除草剂及其筛选体系提供了基础.