【摘 要】
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目的克隆人的高迁移率族蛋白B1（HMGBl）基因，插入pc-DNA3载体中并检测其对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）报告基因活性的影响。方法采用聚合酶链反应（PCR）技术，从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院烧伤研究所,军事医学科学院生物工程研究所
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目的克隆人的高迁移率族蛋白B1（HMGBl）基因，插入pc-DNA3载体中并检测其对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）报告基因活性的影响。方法采用聚合酶链反应（PCR）技术，从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出HMGBl基因，插入载体pe-DNA3中，确定所扩增的DNA序列；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）在293T细胞中检测其表达；应用报告基因方法检测其对TNF-α报告基因表达的影响。结果酶切和测序结果表明扩增的HMGBl序列正确，大小为648bp。在293T细胞中正确表达相对分子
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