【摘 要】
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目的利用含重组质粒pQE80L-mBAFF的DH5α大肠杆菌，优化表达B细胞活化因子的突变蛋白（mBAFF）。方法研究mBAFF的体外诱导条件，包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度对表达量的影响。对
【机 构】
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第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
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目的利用含重组质粒pQE80L-mBAFF的DH5α大肠杆菌，优化表达B细胞活化因子的突变蛋白（mBAFF）。方法研究mBAFF的体外诱导条件，包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度对表达量的影响。对表达条件进行优化后进行大量表达，经Ni^2＋ NTA亲和层析和SepharcryL S200凝胶过滤层析纯化。流式检测突变蛋白与细胞结合的能力以及MTT检测突变蛋白的生物学活性。结果最佳表达条件是诱导时间4h，诱导温度37℃，IPTG终浓度0．2mmol／L。mBAFF占菌体总蛋白的35％，蛋白纯度达98％以上
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