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摘 要 应用薄层层析法对东宝止咳露口服液中的主要成分盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬进行鉴别。根据化学动力学原理，采用经典恒温法，对东宝止咳露中盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的稳定性进行研究，采用高效液相色谱法进行测定，室温下有效期分别为盐酸伪麻黄碱1.4a、氢溴酸右美沙芬0.4a。
关键词 东宝止咳露 盐酸伪麻黄碱 氢溴酸右美沙芬 薄层层析法 稳定性 经典恒温法
材料试剂与仪器
材料与试剂：东宝止咳露，盐酸伪麻黄碱对照品，氢溴酸右美沙芬对照品，薄层层析用硅胶G，甲醇、四氢呋喃、磷酸、气溶胶等均为分析纯。
仪器：LC-6A高效液相色谱仪，包括LC-6A高压泵；SPD-6AV可变波长紫外检测器；SCL-6A控制器；Rheodyne7125进样阀；C-R4A数据处理机；电热恒温水浴锅；电热恒温水浴箱。
色谱条件：①色谱柱：岛津Shim-pack clc-ODS 150mm×6.0mm。②保护柱：大连物化所色谱中心装C18。③流动相：甲醇：水：四氢呋喃：磷酸：气溶胶（350：150：40：1：1.45），流动相pH值为3.42。④柱温：室温；检测波长：262nm；纸速：5mm/分；衰减ATTEN=3；流速：1.5ml/分。
实验与结果
（1）盐酸伪麻黄碱的鉴别：
供试液：东宝止咳露。
阴性对照液制备：取除去盐酸伪麻黄碱模拟处方，制成不含伪麻黄碱的东宝止咳露作为阴性对照液。
阳性对照液制备：取盐酸伪麻黄碱对照品15.00mg，置5ml量瓶中，加适量水溶解并稀释至刻度，摇匀（3mg/ml）作为阳性对照液。
展开剂：正丁醇∶[KG-*2]冰醋酸∶[KG-*2]水（8∶[KG-*2]2∶[KG-*2]1）。
显色剂：0.5%茚三酮丙酮溶液。
照药典薄层色谱法试验［1］，取上述3种溶液各0.5ml，分别点于同一硅胶G薄层板上展开，取出晾干后，喷以显色剂，并在105℃加热5分钟，供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上，显示一个相同的紫色斑点，而阴性对照液在相应位置上无此斑点。测得Rf值：对照品为0.375，供试品为0.375。
（2）氢溴酸右美沙芬的鉴别：
供试液：东宝止咳露。
阴性对照液制备：取除去氢溴酸右美沙芬、扑尔敏（因扑尔敏在鉴别中也会出现斑点）的模拟处方，制成不含氢溴酸右美沙芬、扑尔敏的东宝止咳露作为阴性对照液。
阳性对照液：精密称取氢溴酸右美沙芬对照品7.500mg，置5ml量瓶中，加适量水溶解并衡释至刻度，摇匀（1.5mg/ml）。
展开剂∶[KG-*2]环已烷∶[KG-*2]甲苯∶[KG-*2]乙胺（70∶[KG-*2]15∶[KG-*2]12）。
显色剂：新配制的改良碘化铋钾试液。
按照药典薄层色谱法试验，取上述3种溶液各0.5ml，分别点于同一硅胶G薄层板上（雁荡山试剂厂硅胶G制备）。展开，取出晾干后，喷以显色剂，供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上，显示一个相同的橙红色斑点，另外在供试品的色谱中，橙红色斑点下方有一橙黄色斑点，这是扑尔敏的色谱斑点，而阴性对照液在相应位置上无任何斑点，测得Rf值：氢酸右美沙芬对照品为0.435。供试品氢酸右美沙芬为0.435。
稳定性研究：①含量测定：精密吸取东宝止咳露1ml置于10ml容量瓶中，用流动相稀释至10ml，取稀释液用高压液相色谱仪分别测量东宝止咳露中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量，进样10ml。②稳定性实验：取东宝止咳露，封装于5ml安瓿中，分成数组，每组2支，分别于90℃、80℃、70℃、60℃恒温水浴中进行加速试验，定时取样，每次精密吸取样品液1ml，用流动相稀释成10ml，采用高效液相色谱法分别测定东宝止咳露中盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的含量，测定结果见表1、2。③确定反应级数：根据表1各恒温条件下加热时间与含量变化以logC-t作图，显示直线，说明该药的盐酸伪麻子黄碱、氢溴酸右美沙芬随温度、时间变化符合一级降解反应。将表1、2数据以logC对时间t作线性回归得到不同温度的logC与t的回归方程，并求得分解速度常数K。见表3、4。④预测有效期：将反应速度常数的对数logk对绝对温度的倒数1/T 回归处理得Arrhenius方程，将T=237+25代入方程，求得25℃的反应速度数K25，根据t0.9=0.1054/k计算,预测有效期：
盐酸伪麻黄碱：logk=9.1964-4245.5861/Tr=-0.9809
K=8.9020×10-6 t0.9=1.4a
氢酸右美沙芬：logk=7.3918-3547.6428/Tr=-0.9809
K=3.0687×10-5 t0.9=0.4a
由表3、4可以看出，各温度下的logC与t相关性很大，这进一步证明盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的分解均属于一级降解反应。
讨 论
根据有关文献［2］，对东宝止咳露中两种组分鉴别的色谱系统进行筛选，选出最佳薄层色谱条件。在薄层色谱的研究和应用中［3］，吸附剂的吸附性能是应考虑的主要因素之一，而吸附剂的pH值和颗粒细度对分离效能、Rf值和展开速度均有一定影响。实验结果显示，盐酸伪麻黄碱对青岛硅胶G分离效果最佳，氢酸右美沙芬对雁荡山试剂厂的硅胶G分离效果最佳。采用TLC方法，对东宝止咳露中的两种组分进行鉴别，操作简便，重现性好，专属性强，赋形剂对实验结果无干扰，可作为该制剂的鉴别手段。
根据稳定性预测数据，本实验4个不同温度的logC对t作图为一直线，故按一级反应进行数据处理。
由Arrhenius公式所得回归方程之斜率求得本制剂中两种成分的活化能，由实验说明，本品在室温下较稳定，且实验相关性好，实验结果可靠。
参考文献
1 中国药典.2000年.二部.
2 安登魁，主編.药物分析济南出版社，1992：668-678.
3 中国人民解放军总后勤部药品检验所，编.药品检验，1979.
关键词 东宝止咳露 盐酸伪麻黄碱 氢溴酸右美沙芬 薄层层析法 稳定性 经典恒温法
材料试剂与仪器
材料与试剂：东宝止咳露，盐酸伪麻黄碱对照品，氢溴酸右美沙芬对照品，薄层层析用硅胶G，甲醇、四氢呋喃、磷酸、气溶胶等均为分析纯。
仪器：LC-6A高效液相色谱仪，包括LC-6A高压泵；SPD-6AV可变波长紫外检测器；SCL-6A控制器；Rheodyne7125进样阀；C-R4A数据处理机；电热恒温水浴锅；电热恒温水浴箱。
色谱条件：①色谱柱：岛津Shim-pack clc-ODS 150mm×6.0mm。②保护柱：大连物化所色谱中心装C18。③流动相：甲醇：水：四氢呋喃：磷酸：气溶胶（350：150：40：1：1.45），流动相pH值为3.42。④柱温：室温；检测波长：262nm；纸速：5mm/分；衰减ATTEN=3；流速：1.5ml/分。
实验与结果
（1）盐酸伪麻黄碱的鉴别：
供试液：东宝止咳露。
阴性对照液制备：取除去盐酸伪麻黄碱模拟处方，制成不含伪麻黄碱的东宝止咳露作为阴性对照液。
阳性对照液制备：取盐酸伪麻黄碱对照品15.00mg，置5ml量瓶中，加适量水溶解并稀释至刻度，摇匀（3mg/ml）作为阳性对照液。
展开剂：正丁醇∶[KG-*2]冰醋酸∶[KG-*2]水（8∶[KG-*2]2∶[KG-*2]1）。
显色剂：0.5%茚三酮丙酮溶液。
照药典薄层色谱法试验［1］，取上述3种溶液各0.5ml，分别点于同一硅胶G薄层板上展开，取出晾干后，喷以显色剂，并在105℃加热5分钟，供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上，显示一个相同的紫色斑点，而阴性对照液在相应位置上无此斑点。测得Rf值：对照品为0.375，供试品为0.375。
（2）氢溴酸右美沙芬的鉴别：
供试液：东宝止咳露。
阴性对照液制备：取除去氢溴酸右美沙芬、扑尔敏（因扑尔敏在鉴别中也会出现斑点）的模拟处方，制成不含氢溴酸右美沙芬、扑尔敏的东宝止咳露作为阴性对照液。
阳性对照液：精密称取氢溴酸右美沙芬对照品7.500mg，置5ml量瓶中，加适量水溶解并衡释至刻度，摇匀（1.5mg/ml）。
展开剂∶[KG-*2]环已烷∶[KG-*2]甲苯∶[KG-*2]乙胺（70∶[KG-*2]15∶[KG-*2]12）。
显色剂：新配制的改良碘化铋钾试液。
按照药典薄层色谱法试验，取上述3种溶液各0.5ml，分别点于同一硅胶G薄层板上（雁荡山试剂厂硅胶G制备）。展开，取出晾干后，喷以显色剂，供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上，显示一个相同的橙红色斑点，另外在供试品的色谱中，橙红色斑点下方有一橙黄色斑点，这是扑尔敏的色谱斑点，而阴性对照液在相应位置上无任何斑点，测得Rf值：氢酸右美沙芬对照品为0.435。供试品氢酸右美沙芬为0.435。
稳定性研究：①含量测定：精密吸取东宝止咳露1ml置于10ml容量瓶中，用流动相稀释至10ml，取稀释液用高压液相色谱仪分别测量东宝止咳露中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量，进样10ml。②稳定性实验：取东宝止咳露，封装于5ml安瓿中，分成数组，每组2支，分别于90℃、80℃、70℃、60℃恒温水浴中进行加速试验，定时取样，每次精密吸取样品液1ml，用流动相稀释成10ml，采用高效液相色谱法分别测定东宝止咳露中盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的含量，测定结果见表1、2。③确定反应级数：根据表1各恒温条件下加热时间与含量变化以logC-t作图，显示直线，说明该药的盐酸伪麻子黄碱、氢溴酸右美沙芬随温度、时间变化符合一级降解反应。将表1、2数据以logC对时间t作线性回归得到不同温度的logC与t的回归方程，并求得分解速度常数K。见表3、4。④预测有效期：将反应速度常数的对数logk对绝对温度的倒数1/T 回归处理得Arrhenius方程，将T=237+25代入方程，求得25℃的反应速度数K25，根据t0.9=0.1054/k计算,预测有效期：
盐酸伪麻黄碱：logk=9.1964-4245.5861/Tr=-0.9809
K=8.9020×10-6 t0.9=1.4a
氢酸右美沙芬：logk=7.3918-3547.6428/Tr=-0.9809
K=3.0687×10-5 t0.9=0.4a
由表3、4可以看出，各温度下的logC与t相关性很大，这进一步证明盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的分解均属于一级降解反应。
讨 论
根据有关文献［2］，对东宝止咳露中两种组分鉴别的色谱系统进行筛选，选出最佳薄层色谱条件。在薄层色谱的研究和应用中［3］，吸附剂的吸附性能是应考虑的主要因素之一，而吸附剂的pH值和颗粒细度对分离效能、Rf值和展开速度均有一定影响。实验结果显示，盐酸伪麻黄碱对青岛硅胶G分离效果最佳，氢酸右美沙芬对雁荡山试剂厂的硅胶G分离效果最佳。采用TLC方法，对东宝止咳露中的两种组分进行鉴别，操作简便，重现性好，专属性强，赋形剂对实验结果无干扰，可作为该制剂的鉴别手段。
根据稳定性预测数据，本实验4个不同温度的logC对t作图为一直线，故按一级反应进行数据处理。
由Arrhenius公式所得回归方程之斜率求得本制剂中两种成分的活化能，由实验说明，本品在室温下较稳定，且实验相关性好，实验结果可靠。
参考文献
1 中国药典.2000年.二部.
2 安登魁，主編.药物分析济南出版社，1992：668-678.
3 中国人民解放军总后勤部药品检验所，编.药品检验，1979.