【摘 要】
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本实验在以p-NPP为底物、氯化铈为捕捉剂、Tricine-KOH为缓冲液的中性最适环境中温育大鼠肝组织,进行肝细胞、血窦内皮细胞和枯否氏细胞内溶酶体膜上H~+-ATP酶定位的细胞化学
【机 构】
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上海医科大学生物物理学教研室,上海医科大学生物物理学教研室,上海医科大学生物物理学教研室 200032青岛医学院,200032,200032
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本实验在以p-NPP为底物、氯化铈为捕捉剂、Tricine-KOH为缓冲液的中性最适环境中温育大鼠肝组织,进行肝细胞、血窦内皮细胞和枯否氏细胞内溶酶体膜上H~+-ATP酶定位的细胞化学研究。温育反应形成的磷酸铈反应产物电子密度高、颗粒细、分布均匀、非特异性反应产物少、重复性好。对照实验证实,溶酶体膜上的H~+-ATP酶是对哇巴因耐受的,对NEM敏感的囊泡膜H~+-ATP酶。
In this experiment, rat liver tissue was incubated in the neutral neutral pH buffer containing p-NPP as substrate, cerium chloride as capture reagent and Tricine-KOH as buffer solution, and the hepatocytes, sinusoidal endothelial cells and Kupffer cells Cytochemistry study of localization of H ~ + -ATPase in endolysomembrane. The incubation reaction of cerium phosphate reaction product of high electron density, fine particles, uniform distribution, non-specific reaction products, good repeatability. Control experiments confirmed that the lysosomal membrane H ~ + -ATPase is ouabain-resistant, NEM-sensitive vesicular membrane H ~ + -ATP enzyme.
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