【摘 要】
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目的 探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）来源的外泌体中miR-126-3p靶向趋化因子受体1（chemokine receptor 1,CCR1）对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 培养BMSC细胞,提取外泌体并通过外泌体标志蛋白CD63和TSG101进行鉴定;外泌体共培养A549细胞不同时长（0、24、48、72 h）后,CCK-8检测细胞
【基金项目】
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重庆市科委科技项目（No.cstc2013jcyjA10108）资助；
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目的 探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）来源的外泌体中miR-126-3p靶向趋化因子受体1（chemokine receptor 1,CCR1）对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 培养BMSC细胞,提取外泌体并通过外泌体标志蛋白CD63和TSG101进行鉴定;外泌体共培养A549细胞不同时长（0、24、48、72 h）后,CCK-8检测细胞存活率,qRT-PCR检测miR-126-3p和CCR1 mRNA表达,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blotting检测CCR1、上皮钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）、神经钙黏蛋白（N-cadherin,N-cad）和波形蛋白（Vimentin）相对表达。结果 外泌体呈边缘高亮、中间灰暗的圆形或椭圆形杯状结构,粒径分布范围152 nm左右,有CD63、TSG101蛋白表达;外泌体中miR-126-3p表达高于A549细胞,A549细胞中CCR1 mRNA表达高于外泌体,而在A549细胞与外泌体共培养后,A549细胞中miR-126-3p表达升高,CCR1表达降低;A549细胞与外泌体共培养0、24、48、72 h,细胞的存活率、迁移和侵袭能力和CCR1、N-cad和Vimentin蛋白表达及CCR1 mRNA表达均随着培养时间的延长逐渐降低,而miR-126-3p水平和E-cad蛋白表达随着培养时间的延长逐渐升高。结论 BMSCs来源的外泌体与A549细胞共培养可提高细胞中miR-126-3p的表达,miR-126-3p通过靶向抑制CCR1表达可降低A549细胞增殖、迁移和侵袭能力。
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