【摘 要】
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通过优化牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子，转座形成穿梭载体，将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞，利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白；以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原，建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法，并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清，验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示：本研究建立的
【基金项目】
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农业农村部跨境动物疫病防控机制建设项目（2130114-FK）； 现代农业产业体系建设专项（CARS39）；
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通过优化牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子，转座形成穿梭载体，将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞，利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白；以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原，建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法，并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清，验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示：本研究建立的间接ELISA方法对相关的牛病毒血清抗体无交叉反应，敏感性可达1:512，组内和组间变异系数均低于10%；使用建立的间接ELISA检测方法结合血清中和试验，对480份临床血清样品进行检测，发现两者敏感性符合率为98.18%，特异性符合率为93.33%，总符合率为96.67%。结果表明，本研究建立的检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可开发为临床适应的检测试剂盒。
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