【摘 要】
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目的构建人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)两种基因型的表面糖蛋白G基因原核表达体系,以成功表达的hMPV表面糖蛋白为基础,建立稳定有效的血清抗体检测方法。方法分别
【基金项目】
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国家自然科学基金(30800984)
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目的构建人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)两种基因型的表面糖蛋白G基因原核表达体系,以成功表达的hMPV表面糖蛋白为基础,建立稳定有效的血清抗体检测方法。方法分别以hMPV两种基因型的G基因质粒为模版扩增目的片段,克隆到pBluescriptⅡPhagemid载体,测序后,将目的片段经双酶切后克隆到表达载体pET 32-a-(c+),诱导表达目的蛋白,作为包被抗原,用ELISA方法对106份血清样品进行检测。结果成功表达了hMPV两种基因型的表面糖蛋白G,并用此检测哈尔滨地区因非呼吸道感染住院患者血清样品106份,在不同年龄组中,抗hMPV-A型的血清阳性率分别为:≤10岁6.25%、10～20岁6.67%、20～40岁12.50%、40～60岁16.67%、>60岁21.74%;抗hMPV-B型的血清阳性率分别为:≤10岁12.50%、10～20岁6.67%、20～40岁18.75%、40～60岁22.22%、>60岁30.43%。结论成功表达了两种基因型hMPV的表面糖蛋白G,并建立了检测人血清抗体的ELISA方法。检测结果显示hMPV感染在哈尔滨地区人群中不少见,整体上来说,随着年龄的增加,血清抗体阳性率也是增高的。
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