【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染性病原.PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是开发PRRSV病毒新型疫苗的目标基因.利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,将PRRS
【机 构】
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浙江大学动物科学学院,浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所
【基金项目】
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浙江省科技厅重大科技专项项目;国家自然科学基金
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染性病原.PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是开发PRRSV病毒新型疫苗的目标基因.利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,将PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTh中,获得重组转移质杜pFastBacHTb-E和pFastBacHTb-M,转化大肠杆菌Bm DH10 Bac感受态细胞,获得重组杆粒BmNPV Bacmid-E,BmNPV Bacmid-M,将这些重组杆粒转染家蚕培养细胞Bm5,获得重组病毒BmNPV-E和BmNPV-M.将2种重组病毒分别接种5龄起蚕,用 SDS-PAGE和Western blotting方法在重组Bacmid DNA转染的Bm5细胞和感染重组病毒的家蚕幼虫血细胞中分别检测到分子质量约20 kD和18 kD的E蛋白和M蛋白,表明PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白在家蚕培养细胞及幼虫体内获得了表达,为利用家蚕-杆状病毒表达系统研制PRRSV的新型疫苗与诊断试奠莫定了基础.
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