论文部分内容阅读
目的：建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术，分析各种影响因素，评估其实用性。方法：克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物，挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒，并以之为模板，在Rotor-Gene3000实时定量PCR仪进行扩增和链融解，分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素。结果：基于Rotor-Gene的链融解曲线法，不仅可以区分甲基化与非甲基化，而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异；主要的影响因素有