人STAT3基因siRNA真核表达质粒的构建及鉴定

来源 :临床肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wu000mengya
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目的:构建针对人STAT3基因的siRNA真核表达质粒,检测其在细胞水平对STAT3基因表达的抑制效果。方法:用DNA重组技术将针对人STAT3基因mRNA序列不同位点设计的3个siRNA序列克隆到真核表达质粒pRNAT-U6.1/neo中构建重组体pRNAT-U6.1-siRNA,重组质粒经PCR检测及测序分析,用脂质体转染重组质粒至人食管癌Eca-109细胞,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western blot检测STAT3基因mRNA和蛋白的表达,筛选最佳沉默效率的siRNA。结果:PC
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