【摘 要】
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目的明确化合物20C是否具有抗炎作用以及相关机制。方法脂多糖（LPS）1 mg·L-1和不同浓度的20C(0.1,1.0和10μmol·L-1)同时处理BV-2细胞24 h,采用ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因
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目的明确化合物20C是否具有抗炎作用以及相关机制。方法脂多糖（LPS）1 mg·L-1和不同浓度的20C(0.1,1.0和10μmol·L-1)同时处理BV-2细胞24 h,采用ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达。Western蛋白质印迹法检测炎症介质相关蛋白一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化酶2（COX-2）和自噬相关蛋白(Beclin-1, LC3,Atg5和Atg12)的表达,同时免疫荧光法观察细胞内自噬小体的产生。自噬激活剂雷帕霉素(100 nmol·L-1)提前孵育BV-2细胞2 h,再给予LPS(1 mg·L-1)24 h,Western蛋白质印迹法检测促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）相关通路蛋白（P38, JNK和ERK）,Toll样受体4（TLR4）, p-Akt和p-mTOR蛋白的表达。结果 20C可以减少炎症因子释放以及炎症介质的表达。20C处理细胞可以明显增加自噬相关蛋白的表达。20C和雷帕霉素均可以通过抑制MAPK和TLR4/Akt/mTOR通路激活来增加自噬。结论 20C通过MAPK和TLR4/Akt/mTOR通路调节自噬进而发挥抗炎作用。
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