【摘 要】
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目的 探讨右美托咪啶(DEX)或B淋巴细胞瘤基因(Bcl)-2腺病毒E/B19 kDa相互作用蛋白(BNIP3)基因siRNA对大鼠肾腺嗜铬瘤(PC) 12细胞凋亡的影响及机制.方法 PC12细胞分为阴性对照
【机 构】
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浙江大学医学院附属第一医院疼痛科,浙江 杭州,310003;丽水市人民医院 麻醉科;丽水市人民医院 重症医学科
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目的 探讨右美托咪啶(DEX)或B淋巴细胞瘤基因(Bcl)-2腺病毒E/B19 kDa相互作用蛋白(BNIP3)基因siRNA对大鼠肾腺嗜铬瘤(PC) 12细胞凋亡的影响及机制.方法 PC12细胞分为阴性对照siRNA(NC)组、过氧化氢(H2O2)组、DEX组、si-BNIP3组和DEX+si-BNIP3组,其中siRNA转染参照LipofectamineTM2000说明,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)水平;Western印迹检测BNIP3、核因子(NF)-κB p65、κB抑制蛋白激酶(IKK)α和Bcl-2的蛋白表达.结果 转染BNIP3 siRNA的PC12细胞BNIP3蛋白表达显著低于空白组(P＜0.05).H2O2组细胞活力及Bcl-2的蛋白表达均显著低于NC组,细胞凋亡率、ROS水平及NF-κB p65和IKKα的蛋白表达均显著高于NC组(P＜0.05);DEX组和si-BNIP3组细胞活力及Bcl-2的蛋白表达均显著高于H2O2组,低于DEX+si-BNIP3组,细胞凋亡率、ROS水平及NF-κB p65和IKKα的蛋白表达均显著低于H2O2组,高于DEX+si-BNIP3组(P＜0.05).结论 DEX或BNIP3基因siRNA均可增加PC12活力,抑制细胞凋亡率,联用效果强于单用,机制与降低细胞内ROS水平及下调NF-κB信号有关.
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