变形链球菌pacA和gtfB-cat与ctxB嵌合表达质粒的构建及表达

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目的:构建含变形链球菌表面蛋白A区编码基因(pacA)、葡糖基转移酶催化区编码基因(gtfB—cat)及霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的嵌合表达质粒并表达目的蛋白。方法:将目的基因pacA、gtfB—cat、ctxB克隆至原核克隆载体pET32-a(+)构建嵌合质粒pET—pacA—cat—ctxB,将其转入表达宿主菌E.coliBL21(DE3),并测量其表达情况。结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,证实目的基因均正确插入到载体pET'32a(+)中,插入的相位正确,未改变目的基因的阅读
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