【摘 要】
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目的 探讨五虎汤对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)诱导的哮喘小鼠模型树突细胞自噬和炎性因子白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、白细胞介素-17F(i
【机 构】
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湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学第一附属医院,湖南长沙410007;湖南中医药大学中医学国内一流建设学科,湖南长沙410208
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目的 探讨五虎汤对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)诱导的哮喘小鼠模型树突细胞自噬和炎性因子白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、白细胞介素-17F(interleukin-17F,IL-17F)的影响.方法 采用RSV联合鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立哮喘小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、模型组及五虎汤低、中、高剂量(1.6、3.2、6.4 g/kg)组和地塞米松(1.82 mg/kg)组、雷帕霉素(1 mg/kg)组,连续给药14 d后采用苏木-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理变化,电镜观察肺组织自噬小体变化,Western blotting法检测肺组织树突细胞中微管相关蛋白轻链3Ⅰ(microtubule-associated protein lightc hain 3Ⅰ,LC3Ⅰ)和LC3Ⅱ 表达,ELISA 法检测肺泡灌洗液中IL-17A、IL-17F 的水平.SD大鼠随机分为对照组及五虎汤低、中、高(1.1、2.2、4.4g/kg)组,各给药组ig相应药物,2次/d,连续给药7d后腹主动脉取血,离心取血清,灭活后滤过.将分离的树突细胞与CD4+T细胞共培养,采用RSV联合OVA-17肽建立RSV诱导的树突细胞自噬模型,流式细胞术检测五虎汤含药血清对CD4+T细胞增殖与T细胞活化标志物CD69表达的影响.结果 模型组小鼠气道狭窄,血管周围有大量炎症细胞浸润,肺组织自噬小体增加,自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平显著升高(P＜0.01),IL-17A和IL-17F水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,五虎汤组肺组织炎症表现减轻,肺组织自噬小体增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),IL-17A和IL-17F水平显著降低(P＜0.05、0.01).RSV联合OVA-17肽诱导的树突细胞自噬模型中,与对照组比较,模型组CD4+T细胞增殖与CD69表达均显著升高(P＜0.01);与模型组比较,五虎汤中、高剂量含药血清组CD4+T细胞增殖与CD69表达显著降低(P＜0.05、0.01).结论 RSV可诱导小鼠肺组织树突细胞自噬水平升高,上调IL-17A和IL-17F水平,从而介导炎症反应;五虎汤可通过上调RSV诱导的哮喘小鼠肺组织树突细胞自噬水平,下调IL-17A和IL-17F水平,从而改善哮喘气道炎症.
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