基于p38 MAPK/MSK1/CREB转导通路研究痛泻要方对肝郁脾虚型D-IBS大鼠痛觉敏化的干预作用

来源 :中药新药与临床药理 | 被引量 : 5次 | 上传用户:dej0415
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目的研究痛泻要方对腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,D-IBS)大鼠的痛觉敏化的干预机制。方法将60只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组(0.02 g·kg-1)和痛泻要方低、中、高(2.25、4.5、9 g·kg-1)剂量组,采用番泻叶灌胃联合慢性束缚应急法连续14 d复制肝郁脾虚型D-IBS模型;模型复制结束后第2天,予以匹维溴铵和痛泻要方治疗21 d。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠脊髓背根神经节(DRG)中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-4(IL-4)的含量变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测脊髓DRG中p38丝裂原活化蛋白酶(p38 MAPK)、丝裂原和应激蛋白激酶1(MSK1)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)mRNA的表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测脊髓DRG中p38 MAPK、MSK1、CREB蛋白含量;采用腹部回缩反射(AWR)评价内脏高敏状态。结果痛泻要方中、高剂量组均提高D-IBS模型大鼠腹部回缩反射压力阈值(P <0.01);升高脊髓DRG中IL-4的含量(P <0.01),降低IL-1β、IL-6含量(P <0.01,P <0.05);降低D-IBS模型大鼠脊髓DRG中MSK1 mRNA表达和p38 MAPK、MSK1、CREB蛋白含量(P <0.01)。痛泻要方高剂量组还可同时降低p38 MAPK、CREB mRNA表达(P <0.01)。结论痛泻要方可通过上调D-IBS大鼠脊髓DRG中IL-4和下调IL-6、IL-1β含量,抑制p38 MAPK、MSK1、CREB mRNA的表达和蛋白的含量,降低了内脏痛觉敏化而达到治疗腹泻型肠易激综合征。
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