建立杏仁核点燃耐药性颞叶癫痫大鼠模型,观察环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)及磷酸化环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(p-CREB)在大鼠海马组织中的表达变化,探讨其在耐药性颞叶癫痫形成中的作用。
方法将80只成年雄性SD大鼠按照完全随机数字表法分为对照组(n=10)和模型制作组(n=70)。模型制作组70只大鼠用于制作慢性杏仁核点燃模型,模型制作成功后用苯妥英钠及苯巴比妥进行耐药性癫痫模型的筛选,根据癫痫大鼠对苯妥英钠的反应性,筛选出耐药性癫痫大鼠及药物敏感癫痫大鼠,然后根据完全随机数字表法随机选择药物敏感组(n=10)和耐药模型组(n=10)进行实验,通过行为学、电生理学及病理学HE染色方法观察癫痫模型的特征,用免疫组织化学染色方法和蛋白质印迹法检测CREB及p-CREB的变化,观察正常对照组、药物敏感组及耐药模型组之间的不同。
结果正常对照组大鼠杏仁核脑电图频率为(8.700±1.494)Hz,药物敏感组为(14.700±1.159)Hz,耐药模型组为(19.800±1.686)Hz,3组间差异有统计学意义(F=144.202,P=0.000)。耐药模型组经免疫组织化学染色可见大量CREB、p-CREB阳性细胞的表达。与对照组蛋白表达水平相比(CREB 0.197±0.058、p-CREB 0.260±0.176),敏感组的蛋白表达水平(CREB 0.361±0.151、p-CREB 0.656±0.234)及耐药组的蛋白表达水平(CREB 0.591±0.150、p-CREB 1.077±0.400)升高,差异有统计学意义(F=24.206,P=0.000;F=20.376,P=0.000)。
结论耐药性癫痫大鼠海马中CREB及p-CREB表达均升高,提示其可能在耐药性癫痫发生发展机制中起重要作用。