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目的 建立原位杂交(ISH)方法 检测人微小病毒B19,并确定其在先天性心脏病(CHD)心脏组织细胞的定位分布。方法 以B19特异的衣壳蛋白VPl DNA内1 112 bp片段为模板，采用随机引物标记探针法，建立了ISH检测B19 DNA。结果 通过斑点杂交定性分析显示B19 DNA呈阳性，CMV、HSV和TOXDNA均呈阴性；定量分析B19 DNA浓度于0.1 pg/μl以上呈阳性。在66例先天性心脏病心脏组织中，检测到B19 DNA阳性7例，并发现B19 DNA阳性信号主要定位于心肌细胞核内，38例对照组健康心肌中均阴性。结论 建立的ISH检测先天性心脏病心脏组织B19的方法 有良好的特异性及敏感性，敏感性达0.1 pg/μl，并确定B19 DNA定位于心肌组织的心肌细胞核内。