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为了利用通路克隆（Gateway）技术构建一个含有两个目的基因表达盒的植物表达载体,并把目的基因编码的蛋白质定位到转基因植物的叶绿体中,通过定点突变技术,在含有attL4和attL3重组位点的Gateway入门载体pEN-L4-2-L3中产生HindⅢ和XhoⅠ的酶切位点,然后在这两个酶切位点之间插入一个含有1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基的光诱导型启动子（PrbcS）及其叶绿体基质定位序列（＊T）和绿色荧光蛋白（GFP）报告基因（gfp）的DNA片段,获得pEN-L4＊-PrbcS-＊T-gfp-L3＊