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采用反相悬浮法与溶胶凝胶法结合制备磁性壳聚糖微球，并以此为载体，京尼平为交联剂，脂肪酶为模型酶进行固定化，研究了酶固定化的最优条件和固定化酶的性质。结果表明，在京尼平浓度为0.6 g/L、交联温度为55 ℃、交联时间8 h，固定化酶的比活力最大，为4.31 U/g。固定化酶在25~35 ℃，pH值在8.0有最大活性，其米氏常数Km为0.26 mol/L。同时，固定化酶具有良好的热稳定性及pH稳定性，可重复利用，且能进行磁分离。