猪传染性胃肠炎病毒S基因杆状病毒/昆虫细胞表达系统重组质粒的构建

来源 :东北农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leng159461
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用限制性内切酶从克隆质粒pUC-S中回收猪传染性胃肠炎病毒中国分离株,TH-98株完整的病毒保护性抗原基因,即S基因.按照预定的阅读框架,将S基因克隆于供体质粒pFASTBACHTb的EcoRI、PstI多克隆位点上,并进行酶切鉴定,得到阳性重组质粒BAC-S.用DH10BAC对BAC-S进行转位,获得重组质粒pBAC-S.根据S基因酶切位点分析结果及杆状病毒(Baculovirus)转位区结构特点,用相应的限制性内切酶进行酶切鉴定,并用特异性和通用引物进行PCR分析,证明该重组质粒为含有TH-98株完整
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