【摘 要】
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目的：构建人C-反应蛋白（CRP）原核表达载体，表达纯化his-EGFP-CRP蛋白，观察其能否内化进入HeLa肿瘤细胞。方法：利用特异性引物，从p91023／CRP载体上将编码人CRP的基因序列亚克隆到原核
【机 构】
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南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室
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目的：构建人C-反应蛋白（CRP）原核表达载体，表达纯化his-EGFP-CRP蛋白，观察其能否内化进入HeLa肿瘤细胞。方法：利用特异性引物，从p91023／CRP载体上将编码人CRP的基因序列亚克隆到原核表达载体pET14b／MCS-EGFP-（N）36上；对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定，并将其转化到大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，表达的重组蛋白通过亲和色谱纯化，梯度透析复性，并与HeLa细胞孵育，利用荧光显微镜观察其内化入胞。结果：PCR、双酶切和测序鉴定表明，pET14b／EGFP-h
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